本試驗測試了日糧中添加腸桿菌肽對肉雞的影響，表明腸桿菌肽可以提高生長性能，改善腸道形態，減輕炎癥，并影響糞便微生物區系組成。證明了腸桿菌肽是優秀的抗生素替代物。
腸桿菌肽對大腸桿菌和沙門氏菌攻毒條件下肉雞生長性能、免疫調節和腸道菌群的影響
本研究旨在探討腸桿菌肽對肉仔雞生長性能、免疫調節和腸道微生物區系的影響。試驗選用1日齡AA肉雞（公雞）3120只，隨機分為5組，每組12個重復，每個重復52只雞。試驗分為對照組、攻毒組、不同劑量腸桿菌肽組(0.5 mg/kg、1 mg/kg)和20 mg/kg硫酸粘菌素。與攻毒組相比，腸桿菌肽組體重增加2.6%，總體料重比顯著降低4.2%，糞便中厭氧細菌總數和大腸桿菌數量減少，沙門氏菌感染率也較低，并且十二指腸、空腸和回腸的絨毛高度以及十二指腸和空腸的絨隱比均大于攻毒組。此外，腸桿菌肽還能線性提高十二指腸和空腸的絨毛高度。加入腸桿菌肽后，小鼠血清中TNF-α、IL-1β和IL-6的濃度較攻毒組明顯降低。第21天時，腸桿菌肽可線性降低IL-6水平。綜上所述，日糧中添加腸桿菌肽有效地改善了肉仔雞的生產性能、全身炎癥反應和腸道微生物區系組成。
本研究采用完全隨機設計，對3120只1日齡AA公雞進行了為期42天的飼養試驗。為了達到肉雞的營養需要，配制了不含抗生素和不含抗球蟲的玉米豆粕日糧(NRC，1994)。肉雞隨機分為5個處理組，每個處理12個重復，每個重復52只雞。
（2）、(3)、(4)、(5)組分別在飲水中加入大腸桿菌AZ1(1×106cfu/g)和沙門氏菌CVCC519(1×106cfu/g)進行攻毒，第8天，各組均停止，給予肉雞正常飲水。
腸桿菌肽對大腸桿菌AZ1和沙門氏菌CVCC519的最低抑菌濃度(MIC)
腸桿菌肽對大腸桿菌AZ1和沙門氏菌CVCC519的MIC值都為0.5μg/mL。對陽性對照大腸桿菌ATCC25922的最低抑菌濃度為1μg/mL（表1）。這些結果表明，腸桿菌肽對大腸桿菌和沙門氏菌有較好的抑制作用。
表1：腸桿菌肽對大腸桿菌AZ1和沙門氏菌CVCC519的最低抑菌濃度(MIC)
+：細菌生長，?：細菌未生長
02
生長性能測定
與對照組相比，大腸桿菌和沙門氏菌攻毒顯著降低了肉雞的體重，顯著增加了料肉比和死亡率(p＜0.05)（表2）。添加0.5 mg/kg和1 mg/kg的腸桿菌肽能顯著抑制大腸桿菌和沙門氏菌對肉仔雞生長性能的影響，降低42日齡料肉比和整個試驗期的死亡率(p<0.05)，提高體重(p<0.05)（表2）。
表2：腸桿菌肽對大腸桿菌和沙門氏菌感染下肉雞生產性能的影響
03
糞便細菌計數
糞便細菌計數如圖1所示。與對照組相比，在大腸桿菌和沙門氏菌攻毒7天后，糞便中的需氧細菌總數、大腸桿菌和沙門氏菌感染率顯著增加(p<0.05)。第21天和第42天時，相比于攻毒組，腸桿菌肽組和抗生素組的肉雞糞便中的大腸桿菌數和總需氧細菌顯著減少(p<0.05)，但其數量高于對照組（圖1）。21d時，相比于攻毒組，腸桿菌肽組和抗生素組肉雞糞便中的乳酸菌和雙歧桿菌數顯著增加(p<0.05)，但沙門氏菌感染率無顯著影響。42d時，相比于攻毒組，腸桿菌肽組肉雞的糞便中雙歧桿菌數量顯著增加(p<0.05)，大腸桿菌和沙門氏菌數量顯著降低(p<0.05)。與抗生素組相比，添加腸桿菌肽可顯著降低沙門氏菌感染率(p<0.05)。
綜上所述，添加腸桿菌肽可降低肉雞腸道有害菌的數量，并提高有益菌數量。對沙門氏菌抑制效果好于硫酸粘菌素。
圖1：腸桿菌肽對21日齡和42日齡肉雞糞便中大腸桿菌、乳酸菌、雙歧桿菌和需氧菌總數以及沙門氏菌感染率的影響
04
腸道形態
與對照組相比，大腸桿菌和沙門氏菌感染嚴重破壞了小腸的形態結構，顯著降低了十二指腸和回腸的絨毛高度、隱窩深度和絨隱比以及空腸絨毛高度和絨隱比(p＜0.05)（表3）。
與攻毒組相比，添加腸桿菌肽顯著增加十二指腸和空腸的絨毛高度和絨隱比（p＜0.05）。飼喂0.5 mg/kg和1 mg/kg 腸桿菌肽的雛雞空腸絨毛高度、絨隱比和十二指腸絨毛高度均顯著高于抗生素組（p＜0.05），1 mg/kg 腸桿菌肽對腸道形態損傷有較好的抑制作用。
表3：腸桿菌肽對肉雞十二指腸、空腸和回腸絨毛高度、隱窩深度和絨隱比的影響
在腸粘膜形態上也發現類似的結果。腸道蘇木精-伊紅染色顯示，在十二指腸和回腸被大腸桿菌和沙門氏菌攻毒后，腸道出現更廣泛的損傷和更嚴重的炎癥浸潤(圖2)。而腸桿菌肽和抗生素治療可以減輕粘膜損傷(圖2)。
圖2：腸桿菌肽對肉雞十二指腸、空腸和回腸黏膜形態的影響
05
血清中免疫因子的濃度
腸桿菌肽對血清中免疫調節因子濃度的影響結果如圖3所示。大腸桿菌和沙門氏菌攻毒組小鼠的促炎因子TNF-α、IL-1β和IL-6的分泌量顯著高于其他4組(P＜0.05)。第21天，0.5和1.0 mg/kg 腸桿菌肽組血清中TNF-α、IL-1β和IL-6的水平低于攻毒組，1.0 mg/kg的腸桿菌肽組的IL-6水平低于0.5 mg/kg的腸桿菌肽組。42d時血清中IL-1β和IL-6濃度與對照組相近(p＜0.05)。并且，飼喂腸桿菌肽和抗生素日糧的肉雞的細胞因子是相似的。
綜上所述，1.0 mg/kg的腸桿菌肽抑制促炎因子效果優于0.5 mg/kg的腸桿菌肽組，且與硫酸粘菌素效果相似。
圖3：腸桿菌肽對第21天和第42天血清免疫調節因子濃度的影響
總之，在大腸桿菌和沙門氏菌的攻毒條件下，腸桿菌肽促進了肉雞的生長性能，料肉比降低4.2%，改善腸道形態，減輕炎癥，并影響了糞便微生物區系組成。
參考文獻：Wang G, Song Q, Huang S,et al. Effect of Antimicrobial Peptide Microcin J25 on Growth Performance, Immune Regulation, and Intestinal Microbiota in Broiler Chickens Challenged with Escherichia coli and Salmonella. Animals (Basel). 2020 Feb 21;10(2):345. doi: 10.3390/ani10020345.
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